HEMOCULTIVO

HEMOCULTIVO

INTRODUCCIÓN.-

El hemocultivo consiste en el cultivo de una cierta cantidad de sangre de un paciente.  La sangre es un líquido orgánico estéril, y por tanto, el hallazgo de microorganismos en ella indicará que existe infección, generalmente de carácter grave.

OBTENCION DE LA MUESTRA.-

Cantidad de muestra y número a tomar

Dependerá siempre de la edad y circunstancias del paciente. Si el paciente es un recién nacido bastara con tomar dos muestras de 1-2ml. De sangre respectivamente para diagnosticar una sepsis  neonatal.

Si el paciente es un adulto se sembrarán 10ml de sangre tres a cuatro veces al día, aunque a veces son necesarias más para llegar a aislar al agente etiológico. En estos pacientes hay que distinguir dos cuadros clínicos bien diferenciados.

·         Uno que cursa con bacteriemia continua (fiebre en meseta), características de determinadas infecciones intravasculares como endocarditis o de periodos agudos de infecciones que afectan que afectan al sistema reticuloendotelial.

·         El segundo cuadro clínico seria aquel en que la bacteriemia es intermitente, con fases apiréticas y periodos de fiebre. En este caso lo ideal sería extraer 10ml de sangre antes de que el paciente fuera sometido a tratamiento. Si esto no es posible, entonces se procurará extraer sangre del paciente, cuando empiece a tener síntomas de fiebre pudiendo repetirse la toma de muestra.

Preparación de la piel

Si no hay otra indicación, la toma de muestras se efectúa de la vena que pasa superficialmente por la parte interna de la flexura del codo.

Es condición indispensable el limpiar previamente la zona de alcohol de 70°, desinfectándola seguidamente la zona con alcohol yodado al 2 por 100. Ambas acciones pueden ser sustituidas por una correcta aplicación de povidona yodada. Esta misma acción desinfectante se repetirá sobre el tapón de goma que cubre el frasco de hemocultivo, manteniendo su contacto por lo menos durante un minuto.

Después de la extracción de sangre se taponara la herida con un algodón  empapado en alcohol de 70° y cuando haya parado la hemorragia, se limpia el resto de alcohol yodado con alcohol etílico o isopropanol diluidos. Las tiras de esparadrapo colocadas directamente sobre la piel pintada con yodo pueden originar inflación.

Toma de muestras

Puede efectuarse con aguja y jeringa, o con los instrumentos de doble aguja que existen comercializados especialmente para este fin.

Ante una bacteriemia de origen desconocido es conveniente tomar dos muestras e incubarlas aeróbicas y anaeróbicamente.

Es importante el segundo caso la forma de introducir la sangre en el frasco, procurando que no exista aire dentro de la jeringa y que la inoculación se detenga antes de que el embolo toque el fondo, o cuando todavía quede sangre dentro del tubo que une el sistema de las dos agujas.

De esta forma se evitara introducir aire extraño y se conservará el ambiente anaerobio que existe dentro de las botellas (potencial de óxido-reducción inferior a 100 mv.), conseguido en muchos casos gracias a la adicción de 0,05 por 100 de cisteína.  

METODOLOGÍA

Composición de los medios de cultivo

La botella destinada a hemocultivo debe contener tal cantidad de líquido nutritivo que,  al añadirle la sangre, esta represente como máximo el 10 por 100 total.

La atmosfera de incubación  solo afectará en el caso de la anaerobiosis a que el medio sea producido e incluya un reductor que mantenga el potencial de óxido-reducción suficientemente bajo. En las demás características será igual al destinado a incubación aerobia, incluyendo sustancias nutritivas, CO², vacío y un buen anticoagulante.

Para algunos aerobios estrictos, el vacío puede representar un inconveniente. Un buen método para evitarlo es dejar entrar aire a través de una aguja que sostenga un algodón estéril en la punta, hasta igualar ambas presiones.

Procesamiento de las muestras

Una vez tomada la muestra, se incubaran los frascos a 35°C durante el tiempo que sea necesario. Si se sospecha que el paciente tiene una brucelosis, la incubación de la muestra puede prolongarse por espacio de tres a cuatro semanas.

En otros casos los frascos se examinarán diariamente en busca de alguna señal que indique crecimiento. Es útil observar los hemocultivos con luz transmitida para comprobar aumento de turbidez, producción de gas, hemolisis o grumos depositados en el fondo. Si macroscópicamente se comprueba alguna señal que evidencia la existencia de microorganismos, se procederá a teñir una gota de líquido y a subcultivar  otra en medios enriquecidos. Se mejora enormemente la visualización de los gérmenes cultivados.

A pesar de todo hay algunos microorganismos, como Haemophilus infuenzae, Streptococcus pneumoniae, Bacteroides, Fusobacterium, Neisseria meningitidis, etc… que crecen en el fondo del frasco, sin apenas producir turbidez en el líquido. Para que estos microorganismos no pasen por desapercibidos, se debe incluir una serie de resiembras sistemáticas a partir de hemocultivo inicial.}

Interpretación de resultados

El aislamiento de un reconocido patógeno como un meningococo o un neumococo del seno de un hemocultivo, establece un diagnostico inapelable; sin embargo, el subcultivo de microorganismos que habitualmente crecen sobre la piel, como Staphylococcus epidermidis o determinados difteromorfos, pueden hacer que el microbiólogo dude acerca de su patogenicidad.

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